Після взяття крові натщесерце випробуваний повинен не більше ніж за 5 хвилин випити 75 г безводної глюкози або 82,5 г моногідрату глюкозирозчинених у 250-300 мл води. У процесі тесту не дозволяється куріння. Через 2 години здійснюється повторне взяття крові.
Для приготування 10% розчину глюкози необхідно взяти 1 частину 40% розчину глюкози й 3 частини води, тобто: змішати 5 мл 40% розчину глюкози з 15 мл води для ін'єкцій (для ампули об'ємом 5 мл) або змішати 10 мл 40% розчину глюкози із 30 мл води для ін'єкцій (для ампули об'ємом 10 мл).
Спосіб застосування та дози Спочатку визначається рівень глюкози у крові натще. Після цього протягом 5 хв треба випити 75 г (5 пакетів по 15 г) глюкозирозчиненої в одній склянці (250 мл) води. Під час проведення проби в осіб із надмірною вагою, глюкозу додають із розрахунку 1 г на 1 кг маси тіла, але не більше 100 г.